如今的科研事業(yè)越為廣泛，實(shí)驗(yàn)室抗體試劑的應(yīng)用發(fā)展也越來(lái)越好。今天上海恒遠(yuǎn)為您解說(shuō)二抗的主要應(yīng)用，還包括了了二抗的選擇，一起來(lái)看下：

    1.二抗的主要應(yīng)用

    可以應(yīng)用到幾乎所有類(lèi)型的免疫檢測(cè)中，尤其是Western blot、免疫組織化學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)。

    事實(shí)上，二抗在Elisa及流式細(xì)胞術(shù)中應(yīng)用也很廣泛，不僅用于科學(xué)研究，而且廣泛的應(yīng)用于臨床分析和疾病診斷。比較而言，二抗在免疫沉淀中的應(yīng)用相對(duì)較少。以下內(nèi)容是基于對(duì)所收集的二抗信息進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析后得出的一些結(jié)論，對(duì)于您在具體的實(shí)驗(yàn)中如何選擇的抗體具有借鑒作用。

    2.選擇二抗的方法

    ①考慮因素：有一抗的物種、產(chǎn)生二抗的宿主、一抗的類(lèi)別或亞類(lèi)、二抗所耦聯(lián)的探針類(lèi)型及二抗的形式等等。因此選擇哪種類(lèi)型的二抗很大程度上決定于您所使用的一抗是什么，尤其針對(duì)種屬和類(lèi)別而言。

    ②與一抗的：通常情況下，一抗可以在山羊、小鼠、兔子、大鼠及綿羊體內(nèi)制備，其中屬小鼠及兔子zui為常見(jiàn)，相應(yīng)的，二抗的種屬也應(yīng)當(dāng)與一抗的相一致。而對(duì)于制備二抗的宿主，則應(yīng)選擇另外一種不同的動(dòng)物，一般選用驢、山羊、兔子、綿羊或其他較大的動(dòng)物，可以實(shí)現(xiàn)二抗的大規(guī)模制備，其中又屬山羊使用zui多。

    ③二抗類(lèi)別或亞類(lèi)的選擇：應(yīng)遵循與一抗類(lèi)別或亞類(lèi)相一致的原則，其中抗IgG使用zui多。這可能是因?yàn)槌宋宸N類(lèi)別的單克隆抗體外，很多一抗是多克隆抗體，屬于IgG類(lèi)免疫球蛋白。此外anti-IgG可以識(shí)別幾乎所有類(lèi)型的IgG亞類(lèi)，因此，在不清楚一抗是屬于那個(gè)類(lèi)別或亞類(lèi)的時(shí)候，anti-IgG抗體是個(gè)不錯(cuò)的選擇。

    此外，整個(gè)IgG分子是zui常用的一種二抗分子形式，而F(ab’)2片段或Fab片段一般僅用于特殊實(shí)驗(yàn)中，如需要避免抗體與具有Fc受體的細(xì)胞結(jié)合的情況，或需要封閉內(nèi)源性免疫球蛋白的時(shí)候。

    由于Elisa二抗所具備的優(yōu)點(diǎn)使得其在免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中得以應(yīng)用廣泛。對(duì)于二抗所耦聯(lián)的探針的選擇，主要取決于具體的實(shí)驗(yàn)。對(duì)于Western blot，zui常用的探針是HRP。