一、血清的保存問(wèn)題。
1、問(wèn):2006年6月到期的GIBCO胎牛血清到2007年5月還能用嗎?
答:只有試試了,如果一直在-20℃凍著來(lái)者,應(yīng)該還可以,先少用點(diǎn)看看。養(yǎng)細(xì)胞系應(yīng)該沒(méi)問(wèn)題,原代不行。
2、問(wèn):請(qǐng)問(wèn)我自然溶化好的胎牛血清和1640培養(yǎng)基今天用不上,明天用,我不想放到冰箱里,放在室溫下一晚行嗎?100毫升培養(yǎng)瓶加多少培養(yǎng)基呢?
答:可以放4℃。4-5ml。
3、問(wèn):4℃冰箱內(nèi)保存3個(gè)月的胎牛血清,能否繼續(xù)使用?相關(guān)細(xì)胞和其它試劑的代價(jià)比較高,不敢輕易嘗試。
答:需要長(zhǎng)期保存的胎牛血清必須要保存在-20至-70℃的低溫冰箱中,4℃冰箱中保存時(shí)間不要超過(guò)1個(gè)月。
二、血清滅活時(shí)溫度問(wèn)題。
1、問(wèn):因?yàn)閷?shí)驗(yàn)室水浴鍋失控,血清滅活時(shí),溫度到了61.7℃,這血清還能用嗎?
答:多長(zhǎng)時(shí)間?。慷虝r(shí)間應(yīng)該可以吧,我有一次加熱了一個(gè)多小時(shí),還照樣用。
2、問(wèn):我滅活胎牛血清時(shí),用的電磁爐,定在了70℃,本來(lái)說(shuō)調(diào)溫度到56℃再放血清的,后來(lái)忘了,就把血清放進(jìn)去了,所以滅活的溫度肯定超過(guò)56℃了,不知道這樣對(duì)血清有沒(méi)有影響?
答:常規(guī)滅活建議的溫度在45℃到62℃之間,而時(shí)間則從15分鐘到60分鐘不等,其中常用的手法是56℃熱處理30分鐘。看看你養(yǎng)的細(xì)胞是什么,一般的話估計(jì)問(wèn)題不大,要是很珍貴的細(xì)胞還是慎重一點(diǎn)啊。熱滅活目的是為了去除血清中補(bǔ)體等對(duì)熱敏感的物質(zhì), 在對(duì)補(bǔ)體滅活以外,熱處理同時(shí)也對(duì)血清中可能存在的支原體具有滅活作用?,F(xiàn)在好像不主張熱滅活,熱滅活經(jīng)常給血清產(chǎn)品帶來(lái)負(fù)面影響,對(duì)血清的加熱經(jīng)常導(dǎo)致血清中沉淀的產(chǎn)生,此外,有研究結(jié)果證實(shí)熱滅活步驟減弱了胎牛血清和小牛血清對(duì)細(xì)胞的促粘附作用。